ICS 65. 020. 01 B 16 GE 中华人民共和国国家标准 GB/T 24830—2009 拟毛刺线虫属（传毒种类）检疫 鉴定方法 Identification of Paratrichodorus species as virus-vectors for import and export quarantine 2009-12-15发布 2010-06-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T24830—2009 目 次 前言 1 范围 2 规范性引用文件 3 术语和定义 鉴定依据 仪器和用具 6 试剂和药品 现场检疫 实验室检验 8 9 形态学鉴定 10 结果判定. 11 样品保存…. 附录A（资料性附录） 拟毛刺线虫属传毒种类、地理分布、寄主和所传病毒 附录B（资料性附录） 拟毛刺线虫属与其近似属鉴别特征检索表 附录C（资料性附录） 拟毛刺线虫属9种传毒线虫形态特征图 附录D（资料性附录） 拟毛刺线虫属9种传毒线虫测计值列表 18 附录E（资料性附录） 拟毛刺线虫属部分种类形态特征检索表 19 参考文献 28 GB/T24830—2009 前言 本标准的附录A、附录B、附录C、附录D和附录E均为资料性附录 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国云南出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院， 本标准主要起草人：杜宇、蒋小龙、葛建军、李生贵、段禄华、周剑、梅华全、曹云华、寸东义、 GB/T24830—2009 拟毛刺线虫属（传毒种类）检疫 鉴定方法 1范围 本标准规定了拟毛刺线虫属传毒种类的的检疫鉴定方法。 本标准适用于植物、介质土和土壤中拟毛刺线虫属传毒种类的检疫和鉴定 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准 GB/T24829毛刺线虫属（传毒种类）检疫鉴定方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3. 1 内齿针inner onchium 形成于食道内壁上，可以向前推进，与取食有关的食道齿针。 3.2 乳突papilla 突出于虫体角质层上乳头状的结构，具有感觉功能的器官。 3.3 体孔pores 虫体体内腺体在体表孔状的开口。 3. 4 附着器 supplements 从雄虫虫体角质层分离出来，具有附着功能，特别是在雄虫交配时，起到粘着作用的一种分泌器官。 4鉴定依据 4.1分类地位 中文名：拟毛刺属传毒种类 英文名：Virus-vector species of Stubby-root nematodes 学名：ParatrichodorusCobb,1913 拟毛刺线虫传毒种类隶属线虫门（Nematoda），无侧尾腺纲（Adenophorea），三矛目（Triplonchida Cobb，192o），毛刺总科［（Trichodoroidea（Thorne，1935）Siddiqi，1974），毛刺科［（Trichodoridae （Thorne，1935）Siddiqi1974)，拟毛刺线虫属（ParatrichodorusCobb，1913）。 4.2原理 拟毛刺线虫属传毒种类食性杂，为多年生植物的根部外寄生线虫。不但直接取食为害寄主植物，而 且，因其具有传毒能力，造成更大危害。在已知的49种拟毛刺线虫中，有9种包括葱拟毛刺线虫P.al- 1 GB/T24830—2009 lius、银莲花拟毛刺线虫P.anemones、多变拟毛刺线虫P.divergens、西班牙拟毛刺线虫P.hispanus、较 小拟毛刺线虫P.minor、短小拟毛刺线虫P.nanus、厚皮拟毛刺线虫P.pachydermus、光滑拟毛刺线虫 P.teres和突尼斯拟毛刺线虫P.tunisiensis为烟草脆裂病毒组Tobavirus烟草脆裂病毒（TRV）、豌豆 早褐病毒（PEBV）和辣椒环斑病毒（PRV）的传播媒介。 拟毛刺线虫属传毒线虫主要通过带根苗木、土壤及介质土传播，其形态学特征、传播途径、寄主范 围、地理分布和所传病毒的特性（参见附录A中的表A.1)是制定该检疫鉴定方法的依据。 5仪器和用具 按照GB/T24829的仪器和用具。 6试剂和药品 按照GB/T24829试剂和药品。 7现场检疫 按照GB/T24829进行现场检疫。 8实验室检验 8.1 线虫分离 按照GB/T24829进行线虫分离。 8.2标本制作 按照GB/T24829制作标本。 8.3显微摄影 S若发现拟毛刺线虫，如果雌雄虫都存在时，对雌、雄虫进行显微摄影。如果只有雌虫存在时，对雌虫 进行显微摄影。拍摄的重点包括整体形态；雌虫齿针、排泄孔、阴道、阴门、体孔、生殖系统；雄虫交合刺、 齿针、体孔、乳突和生殖系统等。并在图片上加注显微标尺。 8.4测量 重点测量齿针针长、体长、a、b、V、T、交合刺长、引带长等。 9形态学鉴定 9.1拟毛刺线虫属形态鉴定特征 9.1.1拟毛刺线虫属形态特征描述 虫体角质层经热杀死或遇酸性固定液后强烈膨大。食道通常从背侧覆盖肠，极少不覆盖肠 生殖系统双生殖腺，对生，受精囊有或无；无受精囊时，精子充满子宫，在生殖腺端部极少有精子 有50%的种类存在侧体孔，极少发生在阴门前区。阴道短，明显小于阴门处二分之一体宽；阴道收缩肌 不明显；阴道骨化结果小或不明显；阴门孔状或呈纵裂或横裂状。 雄虫少见，仅有26%的种类有雄虫。雄虫腹中颈乳突无，如果有，通常只有1对颈乳突位于排泄孔 附近，极少有2对颈乳突存在。侧颈乳突无，如有，通常有1对乳突位于齿针基部或排泄孔附近。尾直， 有交合伞，或模糊，或明显。精子大，亚圆柱形的具腊肠形的细胞核；小的具卵圆形或圆形的细胞核；长 形的具长形的细胞核；中等大小的具圆形或梭形的细胞核，或细胞核不明显。交合刺悬肌不明显；交合 刺直。具1个或3个腹中前泄殖腔附着器，有时有4个，在交合伞区，通常有2对附着器，第3个发育不 良，位于交合伞前区，有些种类，只有1个附着器存在。通常具1对亚腹泄殖腔后乳突。有1对泄殖腔 孔存在，极少无。 2