ICS 65. 02 CCS B43 DB5134 四川省（凉山彝族自治州）地方标准 DB 5134/T 39—2023 凉山猪人工授精技术规程 地方标准信息服务平台 2023 -12-05 发布 2023-12-30实施 凉山彝族自治州市场监督管理局 发布 DB5134/T39—2023 目 次 前言、 1范围、 2规范性引用文件 3术语和定义 4公猪调教... 5采精、 6精液品质检查 7精液稀释、分装、保存与运输. 8输精、 9证实方法 附录A（资料性）实验室主要仪器设备 地方标准信息服务平台 DB5134/T39—2023 前言 本标准按照GB/T1.1《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》进行编写。 本标准由凉山彝族自治州农业农村局归口。 本标准由凉山彝族自治州农业科学研究院提出并负责解释。 本标准起草单位：凉山彝族自治州农业科学研究院、凉山彝族自治州农业农村局、西昌市农业农村 局、德昌县农业农村局、国营凉山彝族自治州祖代种猪场。 本标准主要起草人：王强、黄卫平、曾国茂、孙艳、周国燕、王同军、符俊、黄剑锋、周治平、程 晓、徐文德、白文星、黄正美、庞继光、陈鲁喜。 地方标准信息服务平台 II DB5134/T39—2023 凉山猪人工授精技术规程 1范围 本标准规定了凉山猪种公猪调教与采精，精液品质检查、稀释、分装、贮存与运输、输精等人工授 精技术环节应遵循的规则。 本标准适用于凉山州内实施凉山猪人工授精的猪场和养猪户。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 23238 种猪常温精液 GB/T 25172 猪常温精液生产与保存技术规范 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 青年公猪 6月龄～12月龄的凉山猪公猪。 3. 2 成年公猪 3.3 精子密度 3. 4 原精液 采集后未经稀释处理的精液。 3.5 精子活力 在37℃下呈直线运动的精子数占总精子数的百分率。 3. 6 精子畸形率 DB5134/T392023 畸形精子数占总精子数的百分率。畸形精子包括：巨型精子、短小精子、双头或双尾精子，顶体膨 胀或脱落、头部残缺或与尾部分离、尾部弯曲的精子。 3.7 子宫体深部输精 利用子宫体深部输精管，将精液直接输入到母猪子宫体内的一种输精方法。 4公猪调教 调教前可先让公猪观摩经调教成功公猪的采精过程，在假母猪台上涂抹发情母猪分泌物。凉山猪后 备公猪5月龄即可进行采精调教，每天可调教1次，每次调教不得超过15min，一旦采精成功，可在第2d、 3d再采精1次，以加强其记忆和促进条件反射的建立。调教公猪要有耐心，不准打骂公猪。 5采精 5.1采精前准备 5.1.1采精室 采精应在室内进行。采精室应清洁无尘，安静无干扰，地面防滑，假母猪台应完好。 5.1.2实验室 实验室室温宜控制在22℃～25℃，避免太阳光直射或紫外线照射。应配置必要的仪器设备。见 附录A。 5.1.3采精公猪 选择采精公猪，修剪包皮部长毛，除去包皮积尿，用0.1%高锰酸钾溶液清洗消毒包皮部位，再用温 水清洗，并擦拭干净。 5.1.4采精员 采精员穿戴洁净工作衣帽，穿长胶鞋，戴无毒聚乙烯手套。手套应先用75%酒精消毒、晾干，30min 后使用。 5.1.5实验室准备 采精杯（内置无毒塑料袋并覆盖四层纱布或一层精液过滤纸）置于38℃的恒温箱中备用；配置精 液稀释液置于恒温水浴锅中预热至35℃待用；调节好质检用的显微镜，开启显微镜载物台上恒温板以 及预热精液密度测定仪；准备好精液分装瓶或袋。 5.2采精原则 采精宜做到定点定时定人。 5.3采精操作 常采用徒手采精法。戴上双层无毒聚乙烯手套，根据采精习惯站在公猪侧面，手持集精杯，在公猪 爬上假母猪台并伸出阴茎来回抽动时，除去外层手套，迅速握住阴茎龟头部分，特别是要抓住螺旋部分， 2 DB5134/T39—2023 压力不宜太大，以控制其龟头不能转动或回缩为限，并带有松紧节奏，以刺激射精。当公猪充分兴奋， 龟头频频弹动时，表示将要射精。一旦开始射精应停止捏动，公猪开始射精时多为精清，不宜收集，应 弃去最初射出的约5m1精液，待射出较浓稠的乳白色或灰白色精液时，应立即以右（左)手持集精杯，放 在稍离开阴茎龟头处将射出的精液收集于集精杯内。射完精后，待公猪退下采精台时，采精员应顺势用 左（右）手将阴茎送入包皮中。不宜粗暴推下或抽打公猪。 5.4采精频率 青年公猪每周1次～2次，成年公猪每周2次～3次。 6精液品质检查 6.1外观 6.1.1颜色 正常的精液为乳白色或浅灰白，精子密度越高，色泽愈浓，其透明度愈低。若有绿色、黄色、淡红 色或红褐色的精液应弃用，并查明原因。 6.1.2气味 略带腥味或臊味，若有异常气味，应废弃。 6.2原精液量 用电子秤称量原精液，按1m1/g计算其精液量。集精用的保温杯和一次性塑料袋先在电子秤上除皮 作好记录后再集精，采精后弃掉过滤纸及上面的蛋白质凝块、异物或杂质，余下的直接称量即是原精液 量。公猪的射精量，一般为100ml～300ml，原精液量大于100m1为合格。 6.3精子密度 推荐使用精液密度仪测定，精液密度仪使用见其说明书，应定期用血细胞计数板法校正。原精液密 度大于10°个/m1为合格。 6.4精子活力 精子活力受环境因素影响较大。原精液精子活力要求不低于70%。取中层精液10μ～15μ，在200 倍或400倍显微镜下检查。检查方法按GB23238中附录A.2。 6.5精子畸形率 精子畸形率要求每头公猪每两周检查一次，不得超过18%。检查方法按GB23238中附录A.4。 7精液稀释、分装、保存与运输 7.1稀释液配制 推荐使用商品稀释剂，并按说明书使用。配制用水应符合GB/T6682中二级水或三级水的要求。预 箱中0℃～4℃冷藏，保存时间不应超过24h。 3 DB5134/T39—2023 7.2确定稀释倍数 根据原精液精子密度计算应稀释倍数，以每剂精液有效精子含量在2×10°个以上，每剂输精量按60 ml来确定稀释倍数。 7.3稀释 7.3.1稀释原则 稀释液与精液要求等温稀释，两者温差不超过1℃，即稀释液应加热至33℃～37℃，以精液温度 为标准，来调节稀释液的温度，不得反向操作。 7.3.2稀释过程 精液采集后应尽快在20min内稀释。将稀释液温度调整到原精液的温度，如稀释液温度过高，则用 未预热的稀释液调节，如过低则调高水浴锅温度，待原精与稀释液同温时，将量取的稀释液沿精液瓶（杯） 壁缓慢加入到精液中，混合均匀。先作1倍～2倍稀释后，等待1min～2min后再将余下的稀释液沿杯壁缓 慢加入到精液中。 7.3.3精液稀释后标准 精液稀释后应静置5min，按上述精子活力检测方法检测精子活力，精子活力≥70%；畸形精子率≤ 18%。精液含有效精子数≥0.34×10°个/ml； 7.4分装 7.4.1规格 精液稀释、检查后，应马上进行分装。以60m1为一个输精头份。 7.4.2标识内容 瓶上加盖密封后，在精液瓶（袋）上贴上标签，标明公猪品种、耳号、采精日期、人工授精站名称、 有效期、剂量和保存温度。 方标准信 7.5保存和运输 7.5.1保存 精液灌装后，应在室温下避光存放1h～1.5h，让温度缓慢降至室温，然后水平放入17℃恒温箱存 放，每天应将精液缓慢摇匀2次～4次，使精液混合均匀，防止精子沉淀引起死亡，同时清除过期精液， 防止混杂。 7.5.2运输 精液运输时，置于16℃～18℃的运输箱内运输，防止温度变化过大和强烈震动。 8输精 8.1输精器械 8.1.1深部输精管 4