(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211256740.2 (22)申请日 2022.10.14 (71)申请人 苏州市职业大 学 地址 215100 江苏省苏州市吴中区致能大 道106号 (72)发明人 高杨　巫星玥　姜程邺　刘臣　 徐小云　黄小萃　俞晟　丁俊锋　 (74)专利代理 机构 安徽潍达知识产权代理事务 所(普通合伙) 3416 6 专利代理师 张丙松 (51)Int.Cl. C12M 3/00(2006.01) C12M 1/34(2006.01) C12M 1/00(2006.01) B08B 9/093(2006.01)B08B 9/08(2006.01) C12Q 1/02(2006.01) G01N 33/569(2006.01) (54)发明名称 环状RNA对于5-氟尿嘧啶抗癌耐药性的验证 装置及方法 (57)摘要 本发明涉及化工制药领域， 且公开了环状 RNA对于5 ‑氟尿嘧啶抗癌耐药性的验证装置及方 法， 所述验证装置包括支撑孔板和孔管， 所述支 撑孔板的表 面均匀插设有孔管， 所述支撑孔板的 底端设置有接取盒， 所述接取盒的底端插设有集 液盒， 所述接取盒的表面滑动连接有限位滑块， 所述限位滑 块的顶端固定连接有压液箱， 所述压 液箱的前侧插设有导水管， 所述导水管的正面连 通有储液箱， 所述储液箱的顶端开设有注入口， 该验证装置可方便的针对单个待清洁的孔管进 行使用， 利用水压， 同步完成对孔管内壁的水冲 和洗刷， 操作较为便利， 对其他孔管内部的药品 样本影响极小， 降低了人为操作失误给验证结果 带来的误差， 保证验证结果的准确性。 权利要求书2页 说明书7页 附图8页 CN 115537329 A 2022.12.30 CN 115537329 A 1.环状RNA对于5 ‑氟尿嘧啶抗癌耐药性的验证装置， 包括支撑孔板(1)和孔管(2)， 其特 征在于， 所述支撑孔板(1)的表 面均匀插设有孔管(2)， 所述支撑孔板(1)的底端设置有接取 盒(4)， 所述接取盒(4)的底端插设有集液盒(5)， 所述接取盒(4)的表面滑动连接有限位滑 块(19)， 所述限位滑块(19)的顶端固定连接有压液箱(9)， 所述压液箱(9)的前侧 插设有导 水管(8)， 所述导水管(8)的正面连通有储液箱(6)， 所述储液箱(6)的顶端开设有注入口 (7)， 所述 导水管(8)的背面连通有活塞块(23)， 所述活塞块(23)与压液箱(9)滑动连接； 所述孔管(2)与支撑孔板(1)通过调节机构相连接， 所述调节机构用以调节孔管(2)的 角度； 所述活塞块(23)的表面设置有补充机构， 所述补充机构用以在导水管(8)复位时接通 水源补充； 所述压液箱(9)的左侧设置有冲洗机构， 所述冲洗机构包括旋液箱(10)， 所述旋液箱 (10)固定在压液箱(9)的表面， 所述旋液箱(10)的左侧转动连接有旋液管(11)， 所述旋液管 (11)的左端 固定连接有刷头(12)， 所述旋液管(11)的表面均匀固定连接有水斗(13)， 所述 旋液管(11)处于旋液箱(10)内部的表 面上均匀开设有入水孔(14)， 所述刷头(12)的表 面均 匀开设有出水孔(15)， 所述旋液箱(10)背侧的顶端连通有第一喷管(16)， 所述旋液箱(10) 背侧的底端 连通有第二喷管(17)， 所述第一喷管(16)与第二喷管(17)的出水端 各朝向一组 水斗(13)， 所述第一喷管(16)和第二喷管(17)的入水端上连通有集水管(18)， 所述集水管 (18)的入水端与压液箱(9)的顶端相连通； 所述集液盒(5)的内部设置有吸附机构， 所述吸附机构固定在限位滑块(19)的底端； 所述支撑孔板(1)底端的左右两侧固定连接有第二支撑杆(31)， 所述第二支撑杆(31) 的底端设置有第一支撑杆(29)， 所述第一支撑杆(29)的底端固定在接取盒(4)的顶端， 所述 第二支撑杆(31)和第一支撑杆(2 9)通过螺母(3 0)相连接 。 2.根据权利要求1所述的环状RNA对于5 ‑氟尿嘧啶抗癌耐药性的验证装置， 其特征在 于， 所述调节机构包括套块(32)， 所述套块(32)套接在孔管(2)的表面， 所述套块(32)的前 后两侧转动连接有衔接板(33)， 所述衔接板(33)的表面固定连接有第二导杆(35)， 所述第 二导杆(35)的表面套设有第二 导筒(36)， 所述第二 导筒(36)的内部设置有第二弹簧(34)。 3.根据权利要求2所述的环状RNA对于5 ‑氟尿嘧啶抗癌耐药性的验证装置， 其特征在 于， 所述第二弹簧(34)的一端与第二导筒(36)的内壁固定连接， 所述第二弹簧(34)的另一 端与第二 导杆(35)的表面固定连接 。 4.根据权利要求1所述的环状RNA对于5 ‑氟尿嘧啶抗癌耐药性的验证装置， 其特征在 于， 所述补充机构包括密封板(25)， 所述密封板(25)处于活塞块(23)的内部， 所述活塞块 (23)的表面滑动连接有两组限位滑杆(24)， 所述限位滑杆(24)固定在压液箱(9)前侧的内 壁上， 所述活塞块(23)的背侧固定连接有两组第一导筒(26)， 所述第一导筒(26)的表面滑 动连接有第一导杆( 27)， 所述第一导杆( 27)的表面套设有第一弹簧( 28)， 所述第一导杆 (27)背端固定在 密封板(25)的正 面。 5.根据权利要求4所述的环状RNA对于5 ‑氟尿嘧啶抗癌耐药性的验证装置， 其特征在 于， 所述第一弹簧(28)的一端与第一导筒(26)的表面固定连接， 所述第一弹簧(28)的另一 端与第一 导杆(27)的表面固定连接 。 6.根据权利要求1所述的环状RNA对于5 ‑氟尿嘧啶抗癌耐药性的验证装置， 其特征在权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115537329 A 2于， 所述螺母(30)的顶端与第二支撑杆(31)的底端通过螺纹相连接， 所述螺母(30)的底端 与第一支撑杆(2 9)的顶端通过螺纹相连接 。 7.根据权利要求1所述的环状RNA对于5 ‑氟尿嘧啶抗癌耐药性的验证装置， 其特征在 于， 所述吸附机构包括海绵块(21)， 所述海绵块(21)的顶端固定连接有 连接块(20)， 所述连 接块(20)的顶端固定连接有螺 栓(22)， 所述螺 栓(22)与限位滑块(19)通过螺纹转动连接 。 8.根据权利要求1所述的环状RNA对于5 ‑氟尿嘧啶抗癌耐药性的验证装置， 其特征在 于， 所述储液箱(6)的底端设置有承载板(3)， 所述接取盒(4)正面固定连接有限位滑板 (37)， 所述承载板(3)的底端与限位滑板(37)滑动连接 。 9.环状RNA对于5 ‑氟尿嘧啶抗癌耐药性的验证方法， 所述方法是对如权利要求1 ‑8中任 意一项所述的环状RNA对于5 ‑氟尿嘧啶抗癌耐药性的验证装置的实施方法， 其特征在于， 包 括以下步骤： Step1： 提取处在对数生长期的人肺癌细胞， 用胰酶消化， 制成适合密度的单细 胞悬液， 每孔加入100 μl， 使每份样本内的细胞密度为2000个细胞/孔， 然后放回二氧化碳培育箱 中 培养， 温度保持37℃； Step2： 在 细胞全部贴壁后， 将细胞分为四个组， 每组3个浓度梯度， 分组如下： 5‑氟尿嘧啶组： 加入5 ‑氟尿嘧啶， 调整其浓度分别为1.25、 5、 20 μg/ml， 调整最终体积为 200 μl； 环状RNA组： 加入环状RNA， 调整其浓度分别为1.25、 5、 20 μg/ml， 调整最终体积为20 0 μl； 对照组： 加入三 孔100 μl新鲜培养液； 环状RNA联合5 ‑氟尿嘧啶组： 先加入5 ‑氟尿嘧啶， 再分别加入环状RNA， 调整最终体积为 200 μl； Step3： 将所得样本放入二氧化碳培育箱， 温度保持37℃， 逐步培育24H， 48H， 72H， 在每 个时间节点下， 以显微镜观察细胞 形态， 并拍照记录数据； Step4： 制备MTS溶液， 数据记录完毕后， 每孔加入10μl的MTS溶液， 在二氧化碳培育箱 内， 继续以37℃的温度培 育2H‑4.5H， 观察样本颜色变化， 待变为预期颜色后停止； Step5： 调整酶联免疫检测仪的OD为 490nm后测量各个样本内的吸光 值； Step6： 记录数据， 采用直线回归法计算各样本的半数抑制浓度。 10.根据权利要求9所述的环状RNA对于5 ‑氟尿嘧啶抗癌耐药性的验证方法， 其特征在 于， 所述细胞增殖抑制率的计算公式为： 其中， T代 表细胞增殖抑制率， G代 表加药细胞组OD， M代 表空白OD， D代 表对照组细胞OD。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115537329 A 3