(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211137726.0 (22)申请日 2022.09.19 (71)申请人 宁波市第一医院 地址 315000 浙江省宁波市柳汀街76号 申请人 宁波艾捷康宁生物科技有限公司 (72)发明人 史煌波　翁跃颂　王德明　周杰锋　 (74)专利代理 机构 杭州恒翌专利代理事务所 (特殊普通 合伙) 33298 专利代理师 王从友 (51)Int.Cl. C12Q 1/6806(2018.01) C12M 1/24(2006.01) C12M 1/00(2006.01) (54)发明名称 一种保持病毒颗粒完整的灭活保存液和检 测试管 (57)摘要 本发明属于生物医学检测技术领域， 具体涉 及一种保持病毒颗粒完整的灭活保存液和检测 试管。 一种保持病毒颗粒完整的灭活保存液， 该 保存液按质量百分比计包括以下的组分： 缓冲剂 20‑100mM， 蛋白质变性剂1.00wt% ‑3.00wt%， 稳定 剂0.20wt% ‑2.00wt%， 自由基去除剂0.50wt% ‑ 2.00wt%， 钙镁离子螯合剂0.10wt% ‑0.50wt%； 所 述的蛋白质变性剂选自对羟基苯甲酸乙酯、 重氮 烷基脲、 咪唑烷基脲中的一种或多种混合。 此保 存液能够在常温条件下保护病毒颗粒的完整性， 避免RNA释放、 降解和污染， 提高后续检测的准确 率。 权利要求书1页 说明书4页 附图5页 CN 115449539 A 2022.12.09 CN 115449539 A 1.一种保持病毒颗粒完整的灭活保存液， 其特征在于， 该保存液按质量百分比计包括 以下的组分： 缓冲剂           20‑100mM 蛋白质变性剂      1.00wt%‑3.00wt% 稳定剂           0.20wt%‑2.00wt% 自由基去除剂      0.50wt%‑2.00wt% 钙镁离子螯合剂   0.10wt%‑0.50wt%； 所述的蛋白质变性剂选自对羟基苯甲酸乙酯、 重氮烷基脲、 咪唑烷基脲中的一种或多 种混合。 2.根据权利要求1所述的一种保持病 毒颗粒完整的灭活保存液， 其特征在于， 该保存液 按质量百分比计包括以下的组分： 缓冲剂           40‑80mM 蛋白质变性剂      1.50wt%‑2.50wt% 稳定剂           0.50wt%‑1.50wt% 自由基去除剂      0.60wt%‑1.50wt% 钙镁离子螯合剂   0.15wt%‑0.30wt%。 3.根据权利要求1所述的一种保持病 毒颗粒完整的灭活保存液， 其特征在于， 所述的蛋 白质变性剂选自咪唑烷基脲 。 4.根据权利要求1所述的一种保持病 毒颗粒完整的灭活保存液， 其特征在于， 所述的稳 定剂选自L ‑谷氨酰胺、 甘 氨酸、 glutaGRO中的一种或多种混合。 5.根据权利要求1所述的一种保持病 毒颗粒完整的灭活保存液， 其特征在于， 所述的稳 定剂选自L ‑谷氨酰胺和甘 氨酸的组合。 6.根据权利要求1所述的一种保持病 毒颗粒完整的灭活保存液， 其特征在于， 所述的自 由基去除剂选自还原型谷胱甘肽、 维生素C、 N ‑乙酰半胱氨酸中的一种或多种混合。 7.根据权利要求1所述的一种保持病 毒颗粒完整的灭活保存液， 其特征在于， 所述的自 由基去除剂选自还原型谷胱甘肽。 8.根据权利要求1所述的一种保持病 毒颗粒完整的灭活保存液， 其特征在于， 钙镁离子 螯合剂选自EDTA、 EDTA二钠盐、 EDTA三钾盐中的一种或多种混合。 9.根据权利要求1所述的一种保持病 毒颗粒完整的灭活保存液， 其特征在于， 钙镁离子 螯合剂选自EDTA三钾盐。 10.一种病毒检测试 管， 其特征在于， 该 试管内包括权利要求1 ‑9所述的灭活保存液。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115449539 A 2一种保持病毒颗粒完 整的灭活保存液和检测试管 技术领域 [0001]本发明属于生物医学检测技术领域， 具体涉及一种保持病毒颗粒完整的灭活保存 液和检测试 管。 背景技术 [0002]严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS ‑CoV‑2)， 世界卫生组织(WHO)命名的2019   年冠状病毒(Corona  Virus Disease 2019,COIVD ‑19)是导致呼吸道疾病的病原 体。 这种新 发传染病传播 迅速、 传染性强、 人群普遍易感， 病毒防控刻不 容缓。 [0003]诊断COVID ‑19感染最常用的是荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT ‑PCR)这一方 便可靠的检测技术。 核酸检测的质量控制涉及 多个方面， 样本取材、 保存运输、 检测试剂、 结 果判读等。 样本的保存是影响检测效果的一个关键但又容易被忽视的环节。 在临床 检测中， 病毒样本保存不当会出现各种问题。 RNA病毒的外壳容易破裂， 可能会释放出核酸， 导致核 酸降解， 不及时灭活病毒， 医护人员的感染风险增 加。 [0004]现有一次性使用病毒采样管主要分为含有非灭活型病毒保存液， 以及后续为避免 采集样本和保存运输环节中的感染性， 使用灭活型病毒保存液， 这些灭活型病毒保存液都 利用了胍盐(CN113186251A、 CN113444772A、 CN113736755A、 CN113684253A、 CN114717292A   等)， 使得蛋白质发生变性， 变性裂解病毒， 达到灭活病毒、 释放核酸到保存液中待检。 病毒 的蛋白外壳遭 到破坏， 不利于后续有关病毒形态和结构的研究。 [0005]中国发明专利申请(CN108823286A)公开了血液游离DNA的保护剂为一种组合物， 该组合物包括咪唑烷基脲、 乙二胺四乙酸三钾 二水合物和甘氨酸。 该专利公开了咪唑烷基 脲在保护剂中起到维持细胞稳定， 防止细胞破裂释放DNA的作用。 同样， 在中国发明专利   (CN103789202A、 CN112322615A等)咪唑烷基脲都是起到保护细胞不破裂的作用。 但是在这 些文献中都没有公开在灭活病毒， 而又能够保持病毒颗粒完整的作用。 发明内容 [0006]为了解决上述的技术问题， 本发明的目的是提供一种不含胍盐的能灭活病毒样本 的保存液。 此保存 液能够在常温条件 下保护病毒颗粒的完整性， 避免RNA释放、 降解和污染， 提高后续检测的准确率。 [0007]为了实现上述的目的， 本发明采用了以下的技 术方案： [0008]一种保持病毒颗粒完整的灭活保存液， 该保存液按质量百分 比计包括以下的组 分：说　明　书 1/4 页 3 CN 115449539 A 3