(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202111342932.0 (22)申请日 2021.11.12 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114146187 A (43)申请公布日 2022.03.08 (73)专利权人 中山大学 地址 510300 广东省广州市海珠区新港西 路135号 (72)发明人 郑克威　何意得　陈娟南　 (74)专利代理 机构 华进联合专利商标代理有限 公司 44224 专利代理师 陈春渠 (51)Int.Cl. A61K 47/64(2017.01) A61K 47/54(2017.01) A61K 31/409(2006.01) A61P 9/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 43/00(2006.01)(56)对比文件 CN 111518787 A,2020.08.1 1 CN 111647052 A,2020.09.1 1 WO 9611205 A1,1996.04.18 US 20170 02355 A1,2017.01.0 5 CA 314547 7 A1,2021.01.28 WO 2017072319 A1,2017.0 5.04 HE, Yide等.Selective targeti ng of guanine-vacancy-beari ng G-quadruplexes by G-quartet complementati on and stabilization with a guan ine−peptide conjugate. 《JACS》 .2020,第142卷 邢思宁等.血小板衍 生生长因子受体β与骨 肉瘤的关系研究进 展. 《医学分子生物学杂志》 .2018,第15卷(第3期), 郭佳等.DNA和RNA G-四链体及其小分子 配 体研究进展. 《国际药 学研究杂志》 .2012,第39卷 (第05期),358-367. 郑小辉等.G-四链体DNA稳定剂的研究进 展. 《中国科 学:化学》 .2014,第4 4卷(第04期),484- 494. 审查员 张珮明 (54)发明名称 一种PDGFR-β基因表达抑制剂及其用途 (57)摘要 本发明涉及一种PDGF R‑β基因表达抑制剂， 该抑制剂 含有mPG分子和修饰有细胞递送载体的 mPG分子中的至少一种。 本发明的PDGFR ‑β基因 表达抑制剂， 含有mPG分子和修饰有细胞递送载 体的mPG分子中的至少一种， 实现了mPG分子在细 胞内的递送， 能够通过mPG分子在细胞内特异性 识别和稳定PDGF R‑β缺口G‑四链体， 从而实现了 在细胞内调控其基因的表达， 抑制了其基因的表 达水平。 权利要求书1页 说明书12页 附图9页 CN 114146187 B 2022.11.22 CN 114146187 B 1.mPG分子， 其特 征在于， 所述mPG 分子的结构为： 。 2.权利要求1所述的mPG 分子在制备P DGFR‑β 基因表达抑制剂中的用途。 3.一种含有权利要求1所述的mPG 分子的PDGFR‑β 基因表达抑制剂。 4.根据权利要求3所述的PD GFR‑β 基因表达抑制剂， 其特征在于， 所述mP G分子负载于细 胞递送载体上， 所述细胞递送载体包括细胞穿透肽、 脂质体、 纳米颗粒和聚合物载体中的至 少一种。 5.根据权利要求4所述的PDGFR ‑β 基因表达抑制剂， 其特征在于， 所述细胞穿透肽的氨 基酸序列为GRK KRRQRRR。 6.根据权利要求3 ‑5任一项所述的PDGFR ‑β 基因表达抑制剂在制备调控PDGFR ‑β 基因表 达药物中的用途。 7.根据权利要求6所述的用途， 其特征在于， 采用如权利 要求3‑5任一项所述的PD GFR‑β 基因表达抑制剂靶向细胞内的P DGFR‑β 基因启动子区形成的缺口G ‑四链体。 8.根据权利要求7所述的用途， 其特征在于， 所述PDGFR ‑β 基因表达抑制剂用于靶向细 胞内PDGFR ‑β基因启动子区M ‑2‑3‑4序列形成的缺口G ‑四链体， 所述M ‑2‑3‑4序列为： 5 ′ ‑ GGGGGGGCGGCGGGG‑3′。 9.根据权利要求8所述的用途， 其特征在于， 所述PDGFR ‑β基因表达抑制剂用于下调 PDGFR‑β 基因的表达 。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114146187 B 2一种PDGFR ‑β基因表达抑制剂及其用途 技术领域 [0001]本发明涉及生物医药技术领域， 具体而 言， 涉及一种PDGFR ‑β 基因表达抑制剂及其 用途。 背景技术 [0002]血小板衍生生长因子(Platelet ‑derived growth factor， PDGF)是普遍存在的一 种由sis原癌基因编码的生长因子， 主要由巨核细胞合成， 在组织损伤修复， 血管生成和细 胞分化过程中起到非常重要的作用。 PDGF分子是一个糖蛋白二聚体， 可分为 ‑AA，‑BB和‑AB 三种类型。 PD GF及其受体(Pl atelet‑derived growth factor receptor， PD GFR)在多种人 体肿瘤中都有比较高的表达， 如胰腺癌， 小细胞肺癌， 胃癌和乳腺癌等。 [0003]PDGFR是一种位于细胞表面的受体酪氨酸激酶(Receptor  tyrosine  kinase， RTK)， 可分为两个亚型： PDGF R‑α和PDGFR‑β 。 其中， PDGF R‑β 可以特异性的与 PDGF‑BB或‑AB结 合而被激活， 被激活后， 两个PDGFR之间可以形成二聚体， 并通过自身磷酸化激活下游的信 号转到通路， 以实现其调控细胞分化 生长的功能。 [0004]PDGFR‑β 基因的异常表达可以引起多种疾病的产生， 包括血管疾病， 纤维紊乱以及 癌症等。 研究发现， 通过药物靶向PDGFR ‑β启动子中NHE区域的G ‑四链体， 可以抑制PDGFR ‑β 基因转录， 进 而有望成为P DGFR‑β 异常表达引起的疾病的治疗手段。 [0005]G‑四链体是一种由富含鸟嘌呤(G ‑Rich)核酸形成的四链 结构。 G‑四链体在基因组 DNA中广泛分布， 并富集于基因调节区， 例如基因启动子， 参与转录的调节， DNA复制和重组。 经典G‑四链体通常具有两个或更多个的完整G ‑Quartet平面和四段连续G ‑tract。 除了经典 G‑四链体之外， 还存在包含不完整的G ‑Quartet平 面或部分折叠的结构， 例如携带的鸟嘌 呤 空缺的缺口G ‑四链体和G ‑三链体等。 其中， 缺口G ‑四链体(GVBQ)是一种具有不完整的末端 G‑Quartet平面的G ‑四链体， 末端G ‑Quartet平面存在一个鸟嘌呤空缺， 该空缺位置可以被 鸟嘌呤及其 衍生物填充。 [0006]PDGFR‑β启动子的天然富含鸟嘌呤的DNA含有七段连续的G ‑tract， 分析表明通过 组合其中的四段G ‑tracts可以形成不同类型的G ‑四链体结构， 研究发现， PDGFR ‑β 基因启动 子的天然富含鸟嘌呤的DNA可以形成缺口G ‑四链体(简称PDGFR ‑β 缺口G‑四链体， PDGFR ‑β GVBQ)， 它可以和dGMP， GMP， cGMP等鸟嘌呤类代谢物及含鸟嘌呤的药物分子结合并稳定。 然 而， 目前还缺乏细胞内PDGFR ‑β 缺口G‑四链体生物学效应研究， 也缺乏有效的靶向PDGFR ‑β 基因启动子中的缺口G ‑四链体的药物分子 。 [0007]研究表明， 来自RHAU蛋白的G ‑四链体结构结合结构域的23个氨基酸(RHAU23)与鸟 嘌呤碱基偶联的化合物分子(GRPC)， 具备高特异 性和高亲和力的识别和稳定缺口G ‑四链体 的能力。 但GRPC分子无法单独应用于细胞内研究， 需要进一步修饰以解决细胞内递送的问 题， 并改善其在 细胞中的抗降解能力。 [0008]因此， 如何实现药物分子在细胞内的递送是开发靶 向细胞内PDGFR ‑β 缺口G‑四链 体药物的难点。说　明　书 1/12 页 3 CN 114146187 B 3