(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111390174.X (22)申请日 2021.11.22 (71)申请人 暨南大学 地址 510632 广东省广州市天河区黄埔大 道西601号 (72)发明人 李亮平　李清扬　 (74)专利代理 机构 广州粤高专利商标代理有限 公司 44102 代理人 段卉 (51)Int.Cl. C07K 14/725(2006.01) C12N 15/12(2006.01) C12N 15/867(2006.01) C12N 5/10(2006.01) A61K 39/00(2006.01)A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种T细胞受体及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种T细胞受体(T  cell  receptor， TCR)及其应用， 该TCR能够与CT83抗原 短肽CT8314‑22/HLA‑A*11： 01复合物特异性结合； 转导了本发明TCR 的T细胞能够被表达CT8314‑22/ HLA‑A*11： 01复合物的树突状细胞特异性激活， 并且对CT83和HLA ‑A*11： 01阳性 的靶细胞(如癌 细胞)产生强有力的杀伤作用； 该发明为CT83癌 症睾丸抗原相关性疾病的TCR ‑T细胞免疫治疗提 供了一个新的途径。 权利要求书1页 说明书11页 序列表9页 附图3页 CN 114213527 A 2022.03.22 CN 114213527 A 1.一种T细胞受体， 其特 征在于， 所述T细胞受体包 含TCRα 链和TCRβ 链； 其中， TCRα 链可变域α CDR 1、 α CDR2、 α CDR3的氨基酸序列分别如SEQ  ID NO： 10～12所示； TCRβ 链可变域β CDR 1、 β CDR2、 β CDR3的氨基酸序列分别如SEQ  ID NO： 13～15所示。 2.根据权利要求1所述的， 其特征在于， 其具有结合CT83抗原短肽CT8314‑22/HLA‑A*11： 01复合物的性质， 其中所述CT83抗原短肽CT8314‑22氨基酸序列如SEQ  ID NO： 9所示。 3.根据权利要求1或2所述的T细胞受体， 其特征在于， TCRα链可变域的氨基酸序列如 SEQ ID NO： 1所示。 4.根据权利要求3所述的T细 胞受体， 其特征在于， TCRα 链的氨基酸序列如SEQ  ID NO： 3 所示。 5.根据权利要求1或2所述的T细胞受体， 其特征在于， TCRβ链可变域的氨基酸序列如 SEQ ID NO： 5所示。 6.根据权利要求5所述的T细 胞受体， 其特征在于， TCRβ 链的氨基酸序列如SEQ  ID NO： 7 所示。 7.一种核酸分子， 其特征在于， 所述核酸分子编码包含权利要求1～6任一项所述的T细 胞受体的核苷酸序列， 或其互补序列。 8.根据权利要求7所述的核酸分子， 其特征在于， 所述核苷酸分子包含SEQ  ID NO： 2所 示的编码TCRα链可变域的核苷酸分子和/或SEQ  ID NO： 6所示的编码TCRβ 链可变域的核苷 酸分子， 或其互补序列。 9.根据权利要求7所述的核酸分子， 其特征在于， 所述核苷酸分子包含SEQ  ID NO： 4所 示的编码TCRα 链的核苷酸分子和/或SEQ  ID NO： 8所示的编码TCRβ 链的核苷酸分子， 或其互 补序列。 10.一种表达载体， 其特 征在于， 包 含权利要求7～ 9所述的核酸分子， 或其互补序列。 11.根据权利要求10所述的表达载体， 其特 征在于， 所述表达载体是病毒载体。 12.一种宿主细胞， 其特征在于， 包含权利要求1～6 中任一项所述的T细胞受体， 权利要 求7～9中任一项 所述的核酸分子， 或权利要求 10～11中任一项 所述的表达载体中的至少一 项。 13.权利要求1～6中任一项所述的T细胞受体， 权利要求7～9任一项所述的核酸分子、 权利要求10～11中任一项所述的表达载体， 或权利要求12所述的宿主细胞， 在制备治疗疾 病的药物中的应用。 14.根据权利要求13所述的应用， 其特征在于， 所述疾病能同时表达癌症睾丸抗原CT83 和HLA‑A*11： 01。 15.根据权利要求14所述的应用， 其特征在于， 所述疾病为胃癌、 肺癌、 肝癌、 食道癌、 膀 胱癌、 前列腺癌、 乳腺癌、 结直肠癌、 卵巢癌、 宫颈癌、 多发性骨髓瘤、 恶性黑色素瘤、 脑胶质 瘤、 软组织肉瘤、 睾丸癌、 胰腺癌、 头颈鳞状细胞癌、 子宫内膜癌、 胆管癌、 肾嫌色细胞癌、 肾 透明细胞癌、 和甲状腺癌。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114213527 A 2一种T细胞受体及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及免疫 治疗技术领域， 具体地， 涉及一种T细胞受体(TCR)及其应用。 背景技术 [0002]睾丸抗原83(CT83)作为一种内源性蛋白质， 在各种恶性肿瘤细胞均有高表达， 属 于癌症睾丸抗原类。 CT8 3在细胞内生 成后被降解 成长短不一的小分子 短肽， 其中能够与HLA 分子结合的短肽， 与之形成复合物， 被转运呈递到细胞表面。 CT83最早是由Fukuyama等人于 2006年发现的[FUKUYA MA T,HANAGIRI  T,TAKENOYAMA M,et al.Identification  of a new  cancer/germLine  gene,CT83,encoding  an antigen recognized  by autologous  CTL  induced on human lung adenocarcinoma.Canc er research,2006,66(9)： 4922 ‑8.]； 以后 陆续有研究表明CT83在81％胃癌[Shida  A,Futawatari  N,Fukuyama  T,et al.Frequent   High Expression  of Kita‑Kyushu Lung Cancer Antigen ‑1(KK‑LC‑1)in Gastric  Cancer.Anticancer  Res.2015； 35(6)： 3575 ‑3579.]， 53％三阴性乳腺癌[Paret  C,Simon  P,Vormbrock  K,et al.CXorf61  is a target for T cell based immunotherapy  of  triple‑negative  breast cancer.Oncotarget.2015； 6(28)： 25356 ‑25367.]， 40％转移性 宫颈癌和40％非小细胞肺癌[ S,Pasetto  A,Helman  SR,et al.Landscape  of  immunogenic  tumor antigens  in successful  immunotherapy  of virally induced  epithelial cancer.Scienc e.2017； 356(6334)： 2 00‑205.]中表 达， 但不在除睾丸外的正 常 组织中表达， 这表明它可能作为T细胞免疫 治疗的安全 靶点。 [0003]目前， 对于上述疾病的治疗， 可以采用化疗和放射性治疗等方法， 但都会对自身的 正常细胞造成损害。 细胞过继免疫治疗指的是， 体外活化和扩增的自体或异体免疫效应细 胞输注患者体内的治疗方法， 该方法对于患者的自身的正常细胞不会严重的损害。 因此进 行细胞过继免疫 治疗的十分必要。 [0004]T细胞过继免疫治疗是将对靶抗原 具有特异性的T细胞输入病人体内， 使其对靶细 胞发挥杀伤作用。 T细胞受体(TCR)是T细胞表 面的一种膜蛋白， 其能够识别靶细胞表面的抗 原短肽/MHC复合物(pMHC复合物)。 在免疫系统中， 通过特异性的TCR与pMHC复合物的结合引 发T细胞与抗原提呈细胞(antigen ‑presenting  cells， APC)直接的物理接触， 然后T细胞及 APC两者的其他细胞膜表面分子就会发生相互作用， 导致T细胞活化， 从而引起一系列后续 的细胞内信号传递和反应。 活化的T细胞进入增生状态， 进而分化为效应细胞与记忆细胞。 当这些抗原特异性T细胞， 再次遇到抗原阳性同时表达对应MHC 分子的靶细胞(如癌症细胞) 时， 会对靶细胞产生杀伤作用， 从而产生抗癌效果。 因此， 我们致力于分离出对CT83抗原短 肽具有特异性的T细胞， 进而分离对CT83抗原短肽具有特异 性的TCR， 以便用该TCR转导外周 血T细胞， 从而 大量产生对CT8 3短肽具有 特异性的T细胞， 进而用于癌症的过继T细胞免疫治 疗。说　明　书 1/11 页 3 CN 114213527 A 3