(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111375071.6 (22)申请日 2021.11.17 (71)申请人 中国人民解 放军空军 军医大学 地址 710032 陕西省西安市新城区长乐西 路169号 (72)发明人 张翔　刘家云　郝晓柯　史圣甲　 王丽娟　 (74)专利代理 机构 西安正华恒远知识产权代理 事务所(普通 合伙) 61271 代理人 陈选中 (51)Int.Cl. A61K 47/46(2006.01) A61K 47/42(2017.01) A61K 31/7088(2006.01) A61K 45/06(2006.01)A61K 31/4166(2006.01) A61P 35/00(2006.01) C12N 5/10(2006.01) C12N 15/867(2006.01) C12N 15/62(2006.01) (54)发明名称 一种前列腺癌分子靶向系统及其构建方法 和应用 (57)摘要 本发明公开了一种前列腺癌分子靶向系统 及其构建方法和应用。 其包括靶向外泌体以及其 负载的活性成分， 靶向外泌体为能特异性识别 PSMA靶标的靶向外泌体， 活性成分为能够抑制前 列腺增殖、 扩增、 迁移和/或侵袭的成分； 或为降 低其激素抵抗性的成分。 本发明构建了一种能够 特异性靶向前列腺癌的外泌体， 并在其上加载了 能够针对影响前列腺癌激素抵抗进程的siRNA， 阻断并扭转前列腺癌从激素依赖向非依赖发展 的谱系过程， 使肿瘤能重获雄激素的敏感性、 延 长激素治疗有效时间。 权利要求书1页 说明书5页 序列表1页 CN 114081960 A 2022.02.25 CN 114081960 A 1.一种前列腺癌分子靶向系统， 其特 征在于， 包括靶向外泌体以及其负载的活性成分。 2.根据权利要求1所述的前列腺癌分子靶向系统， 其特征在于， 所述靶向外泌体为能特 异性识别P SMA靶标的靶向外泌体。 3.根据权利要求2所述的前列腺癌分子靶向系统， 其特征在于， 所述靶向外泌体的构建 过程为： 将PSMA单链抗体与外泌体膜上的蛋白Lamp2b融合， 构建得到PSMA ‑Lamp2b质粒， 然后慢 病毒包装后感染细胞， 使之分泌产生能特异性识别P SMA靶标的 的靶向外泌体。 4.根据权利要求1或2所述的前列腺癌分子靶向系统， 其特征在于， 所述活性成分为能 够抑制前列腺增殖、 扩增、 迁移和/或侵 袭的成分； 或为降低其激素抵抗 性的成分。 5.根据权利 要求4所述的前列腺癌分子靶向系统， 其特征在于， 所述活性成分为siRNA， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.1或SEQ  ID NO.2所示。 6.一种如权利要求1～5任一项所述的前列腺癌分子靶向治疗系统 的构建方法， 其特征 在于， 包括以下步骤： (1)构建能特异性识别前列腺癌中靶基因的靶向外泌体； (2)设计具有抗肿瘤效果的siRNA， 然后将其加载至靶向外泌体上即可。 7.权利要求1～5任一项所述的前列腺癌分子靶向系统， 或权利要求6所述的构建方法 在制备治疗前列腺癌的药物中的应用。 8.根据权利要求7 所述的应用， 其特 征在于， 所述前列腺癌为去势抵抗型 前列腺癌。 9.一种用于治疗前列腺癌的联合药物， 其特征在于， 包括权利要求1～5任一项所述的 前列腺癌分子靶向系统， 以及抗 雄激素药物。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114081960 A 2一种前列腺癌分子靶向系统及其构建 方法和应用 技术领域 [0001]本发明属于基 因工程技术领域， 具体涉及 一种前列腺癌分子靶向系统及其构建方 法和应用。 背景技术 [0002]前列腺癌是男性生殖系统常见的恶性肿瘤， 其发病率和病死率近年来逐年提高， 并渐趋年轻化。 前列腺癌目前病因未明， 最大特点是其有雄激素依赖性。 对于早期局限性前 列腺癌， 常规手术或抗雄治疗疗效确切， 但是晚期不可避免发展成激素非依赖甚至去势抵 抗型前列腺癌(CRPC)。 CRPC是前列腺癌的最终结局和治疗的重点及难点， 迫切寻找新的有 效治疗方法来 解决耐药的问题。 [0003]最近研究提示谱系可塑性是造成CRPC耐药的关键。 文献报道， 表观遗传分子EZH2 在前列腺癌激素依赖 向非依赖转变过程中起重要作用， 是影响其谱系 可塑性的关键分子， 直接关系到CRPC的耐药抵抗。 众所周知， 前列腺癌激素依赖的特点和雄激素受体(AR)密切 相关， 而抑制EZH2可以恢复AR表达和机体对抗雄治疗的敏感性。 用药物来高效抑制EZH2这 一特殊的功能， 有可能成为治疗和扭转CRPC耐药的一种有效新策略。 [0004]而目前临床可供选择的EZH2小分子抑制剂虽然效果得到证实， 却都不具有选择性 或选择性低， 影响其效果的发挥， 迫切需要寻找更精准的治疗药物。 RNA i作为肿瘤 治疗新技 术前景广阔， 虽然 可以进行精准治疗， 确存在效应分子靶向性差、 转运效率低和靶点选择等 瓶颈。 外泌体是细胞分泌的天然小囊泡， 是细胞间通讯的重要媒介， 能携带和在细胞间传递 多种物质。 研究证明它能够将药物或小分子核酸从供体细胞转移到受体细胞， 从而引发后 者表型的改变， 利用外泌体来向体内递送siRNA能提高RNA输送效率并且比其他人工载体更 加低毒副作用和低免疫反应， 但是需要解决靶向性 不足的缺 点。 发明内容 [0005]针对现有技术中的上述不足， 本发明提供一种前列腺癌分子靶向系统及其构建方 法和应用， 本发明构建了一种能够特异性靶向前列腺癌的外泌体， 并在其上加载了能够针 对影响前列腺癌激素抵抗进程的siRNA， 阻断并扭转前列腺癌 从激素依赖向非依赖发展的 谱系过程， 使肿瘤能重获雄激素的敏感性、 延长 激素治疗有效时间。 [0006]为实现上述目的， 本发明解决其 技术问题所采用的技 术方案是： [0007]一种前列腺癌分子靶向系统， 包括靶向外泌体以及其负载的活性成分。 [0008]进一步地， 靶向外泌体为能特异性识别P SMA靶标的靶向外泌体。 [0009]进一步地， 靶向外泌体的构建过程 为： [0010]将PSMA单链抗体与外泌体膜上的蛋白Lamp2b融合， 构建得到PSMA ‑Lamp2b质粒， 然 后慢病毒包 装后感染细胞， 使之分泌产生能特异性识别P SMA靶标的 的靶向外泌体。 [0011]进一步地， 活性成分为能够抑制前列腺增殖、 扩增、 迁移和/或侵袭的成分； 或为降 低其激素抵抗 性的成分。说　明　书 1/5 页 3 CN 114081960 A 3