(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111338374.0 (22)申请日 2021.11.11 (71)申请人 河南大学 地址 475000 河南省开封市顺河回族区明 伦街85号 (72)发明人 郑蒙　师冰洋　刘洋　任发　 (74)专利代理 机构 北京超成律师事务所 1 1646 代理人 郭莲梅 (51)Int.Cl. A61K 47/69(2017.01) A61K 47/60(2017.01) A61K 47/62(2017.01) A61K 31/4188(2006.01) A61K 31/7088(2006.01) A61K 45/00(2006.01)A61P 25/00(2006.01) A61P 25/14(2006.01) A61P 25/16(2006.01) A61P 25/28(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/02(2006.01) (54)发明名称 一种外泌体递送载体及其制备方法、 应用 (57)摘要 本发明公开了一种外泌体递送载体及其制 备方法、 应用， 涉及医疗领域。 通过HSSP 多肽修饰 使得外泌体能靶向血红素加氧酶1(HMOX1)， 而 HMOX1蛋白高表达于多种肿瘤细胞和神经退行性 疾病， 尤其是耐药性胶质瘤， 基于此， 修饰有HSSP 的外泌体能够特异性靶向肿瘤和神经退行性疾 病， 因此， 本发明的外泌体递送载体也可应用于 靶向治疗或预防肿瘤和/或神经退行性疾病， 为 胶质瘤药物TMZ耐药问题提供了新的解决方案。 而外泌体本身又具有极低的免疫原性， 提升了递 送载体本身的安全性； 同时， 外泌体也具有良好 的血脑屏障穿透能力， 从而有利于破解药物在血 脑屏障穿透难的难题。 权利要求书2页 说明书9页 序列表1页 附图5页 CN 114081965 A 2022.02.25 CN 114081965 A 1.一种外泌体递送载体， 其特征在于， 其包括外泌体以及在外泌体表面修饰的HSSP多 肽， 所述HS SP多肽能靶向血红素加氧酶1。 2.根据权利要求1所述的外泌体递送载体， 其特征在于， 所述HSSP多肽具有如SEQ  ID  NO.1所示的序列； 优选地， 所述HS SP多肽通过接枝材 料修饰于 外泌体膜上； 优选地， 所述接枝材料与所述HSSP多肽共价连接， 所述接枝材料与所述外泌体膜物理 结合； 优选地， 所述接枝材料为DSPE ‑PEG‑Mal， DSPE ‑PEG‑Mal通过马来酰亚胺与所述HSSP多 肽以硫醚键共价连接 。 3.根据权利要求1或2所述的外泌体递送载体， 其特征在于， 所述外泌体的来源为外周 血、 腹水、 尿液、 唾液、 脑脊液、 干细胞、 牛奶或植物； 优选地， 所述外泌体的来源为骨髓间充质干细胞、 脐带间充质干细胞、 血清、 胎盘、 人内 皮祖细胞、 牙髓干细胞、 人胎肝细胞、 牛奶或植物； 优选地， 所述外泌体的平均粒径为5 0‑200nm。 4.根据权利要求1或3所述的外泌体递送载体， 其特征在于， 所述外泌体内负载有药物 或siRNA， 所述药物为治疗或预防肿瘤和/或神经退行性疾病的药物； 优选地， 所述siRNA为 STAT3的siRNA； 优选地， 所述STAT3的siRNA的序列如SEQ  ID NO.1‑2所示； 所述肿瘤包括如下肿瘤中的 至少一种： 胶质母细胞瘤、 肺癌、 脑胶质瘤、 淋巴瘤、 胃癌、 食管癌、 鼻咽癌、 大肠癌、 肝癌、 乳 腺癌、 宫颈癌或白血病； 所述神经退行性疾病 包括如下疾病中的至少一种： 阿尔茨海默病、 帕金森症、 轻度认知 障碍、 亨廷顿症、 朊病毒引起的疾病、 额颞痴呆、 路易体痴呆、 血管性痴呆、 肌萎缩性侧索硬 化症、 慢性损伤性脑病、 进 行性核上性麻痹、 多系统萎缩症、 皮质基底节变性、 皮克氏病和橄 榄体脑桥小脑萎缩； 优选地， 所述药物为 替莫唑胺。 5.根据权利要求4所述的外泌体递送载体， 其特征在于， 所述外泌体中所述药物的载药 量为1‑70％， 所述外泌体中所述siRNA的载 药量为1‑40％； 优选地， 所述外泌体中所述药物的载药量为20 ‑60％， 所述外泌体中所述siRNA的载药 量为1‑30％； 优选地， 当外泌体负载所述药物时， 所述外泌体的浓度 为10‑1000 μg/mL； 当外泌体负载 siRNA时， 所述外泌体的浓度为10 ‑1000 μg/mL。 6.一种如权利要求1 ‑5任一项所述的外泌体递送载体的制备方法， 其特征在于， 其包括 将所述HS SP多肽修饰于所述外泌体表面。 7.根据权利要求6所述的制备方法， 其特征在于， 所述修饰是指： 将所述HSSP多肽与所 述接枝材 料混合， 制得配 体， 然后将所述配 体与所述外泌体混合培 养； 优选地， 在将所述配体与所述外泌体混合培养前， 还包括将药物或siRNA与所述外泌体 进行混合培 养以使得 所述外泌体负载 所述药物或siRNA； 优选地， 所述配体制 备时， 所述HSSP多肽与所述接枝材料的混合摩尔比例为1:1 ‑1.2， 所述接枝材料为DSPE ‑PEG‑Mal， 将所述接枝材料和所述HSSP多肽混合溶解在二甲基亚砜权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114081965 A 2中， 除氧， 混匀20 ‑28h， 透析； 优选地， 选择3 000‑3500道尔顿的透析袋进行透析20 ‑28h； 优选地， 每1mg的外泌体添加5 0‑500 μg的所述配 体。 8.一种药物 组合物， 其特征在于， 其包括权利要求1 ‑5任一项所述的外泌体递送载体和 药学上可接受的添加剂或辅料； 优选地， 所述药物组合物的剂型选自片剂、 丸剂、 粉剂、 混悬剂、 凝胶、 乳液、 乳膏、 颗粒 剂、 纳米颗粒、 胶囊、 栓剂、 注射剂、 喷雾或针剂。 9.一种如权利要求1 ‑5任一项所述的外泌体递送载体或权利要求8所述的药物组合物 在制备治疗或预防肿瘤和/或神经退行性疾病的药物中的应用， 其特征在于， 所述肿瘤 包括 如下肿瘤中的至少一种： 胶质母细胞瘤、 肺癌、 脑胶质瘤、 淋巴瘤、 胃癌、 食管癌、 鼻咽癌、 大 肠癌、 肝癌、 乳腺癌、 宫颈癌或白血病； 所述神经退行性疾病 包括如下疾病中的至少一种： 阿尔茨海默病、 帕金森症、 轻度认知 障碍、 亨廷顿症、 朊病毒引起的疾病、 额颞痴呆、 路易体痴呆、 血管性痴呆、 肌萎缩性侧索硬 化症、 慢性损伤性脑病、 进 行性核上性麻痹、 多系统萎缩症、 皮质基底节变性、 皮克氏病和橄 榄体脑桥小脑萎缩。 10.一种如权利要求1 ‑5任一项所述的外泌体递送载体或权利要求8所述的药物组合物 在制备治疗或预防耐药肿瘤的药物中的应用， 其特征在于， 所述耐药肿瘤为替莫唑胺耐药 肿瘤。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114081965 A 3