(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111370027.6 (22)申请日 2021.11.18 (71)申请人 东莞中芝生物科技有限公司 地址 523808 广东省东莞 市松山湖园区沁 园路17号2栋404室 (72)发明人 戚怡　于丰彦　杨懋勋　 (74)专利代理 机构 东莞市卓易专利代理事务所 (普通合伙) 44777 代理人 杨国锋 (51)Int.Cl. A61K 38/14(2006.01) A61K 38/01(2006.01) A61K 36/074(2006.01) A61K 9/14(2006.01) A61K 47/02(2006.01) A61P 37/04(2006.01)A61P 39/06(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 25/20(2006.01) A61P 3/10(2006.01) A61P 1/00(2006.01) A61P 29/00(2006.01) A61P 1/16(2006.01) A61P 39/02(2006.01) B82Y 5/00(2011.01) B82Y 40/00(2011.01) C12P 21/06(2006.01) C07K 1/107(2006.01) C07K 1/30(2006.01) C07K 1/18(2006.01) C07K 1/16(2006.01) C07K 1/36(2006.01) (54)发明名称 一种灵芝多糖肽纳米 颗粒及其制备方法 (57)摘要 本发明涉及药物制剂技术领域， 具体公开了 一种灵芝多糖肽纳米颗粒及其制备方法。 所述的 灵芝多糖肽纳米颗粒的制备方法， 其包含如下步 骤： S11.将灵芝多糖肽和巯基乙胺加入到PBS溶 液中， 在35～40℃下搅拌20～ 30h； 然后加入硼氢 化钠， 继续搅拌搅拌80～100h， 得固体产物； S12. 将步骤S11制备得到的固体产物进行透析， 得巯 基化灵芝多糖肽； S13.将巯基化灵芝多糖肽与氯 金酸溶液混合， 得混合溶液； 接着向混合溶液中 加入硼氢化钠溶液， 在搅拌条件下反应1～ 3h； 反 应结束后将反应液离心， 取固体沉淀即得所述的 灵芝多糖肽纳米颗粒。 研究表明， 本发明制备得 到的灵芝多糖肽纳米颗粒， 其具有非常稳定的结 构。 权利要求书2页 说明书3页 附图1页 CN 113995830 A 2022.02.01 CN 113995830 A 1.一种灵芝多糖肽 纳米颗粒的制备 方法， 其特 征在于， 包 含如下步骤： S11.将灵芝多糖肽和巯基乙胺加入到PBS溶液中， 在35～40℃下搅拌20～30h； 然后加 入硼氢化钠， 继续搅拌搅拌80～10 0h， 得固体产物； S12.将步骤S1 1制备得到的固体产物进行透析， 得巯基化灵芝多糖肽； S13.将巯基化灵芝多糖肽与氯金酸溶液混合， 得混合溶液； 接着向混合溶液中加入硼 氢化钠溶液， 在搅拌条件下反应1～3h； 反应结束后将反应液离心， 取固体沉淀即得所述的 灵芝多糖肽 纳米颗粒。 2.根据权利要求1所述的灵芝多糖肽纳米颗粒的制备方法， 其特征在于， 步骤S11中， 灵 芝多糖肽、 巯基乙胺、 PBS溶液以及硼氢化钠的用量比为： 5～10mg:3～5mg:10～30ml:0.5～ 1mg； 最优选地， 灵芝多糖肽、 巯基乙胺、 PBS溶液以及硼氢化钠的用量比为： 8mg:5mg:20ml: 1mg。 3.根据权利要求1所述的灵芝多糖肽纳米颗粒的制备方法， 其特征在于， 步骤S11中的 PBS溶液为pH值 为8.0的PBS溶 液。 4.根据权利要求1所述的灵芝多糖肽纳米颗粒的制备方法， 其特征在于， 步骤S12中， 将 步骤S11制备得到的固体产物用去离 子水进行透析。 5.根据权利要求1所述的灵芝多糖肽纳米颗粒的制备方法， 其特征在于， 步骤S12中， 巯 基化灵芝多糖肽、 氯金酸溶 液以及硼氢化钠溶 液的用量比为8～12mg： 4～6mL： 1mL； 最优选地， 步骤S12中， 巯基化灵芝多糖肽、 氯金酸溶液以及硼氢化钠溶液的用量比为 10mg： 5ml： 1ml。 6.根据权利要求1所述的灵芝多糖肽纳米颗粒的制备方法， 其特征在于， 步骤S13中的 氯金酸溶 液的浓度为： 5 Mm。 7.根据权利要求1所述的灵芝多糖肽纳米颗粒的制备方法， 其特征在于， 步骤S13中硼 氢化钠溶 液的浓度为 4～6mM； 最优选地， 步骤S13中硼氢化钠溶 液的浓度为5mM 。 8.根据权利要求1所述的灵芝多糖肽纳米颗粒的制备方法， 其特征在于， 步骤S11中的 灵芝多糖肽通过包 含如下步骤的方法制备 得到： S01.取灵芝提取物， 加入到水中， 接着加入木瓜蛋白酶， 搅拌均匀得混合液； S02.将步骤S01制备得到的混合液置于50～65℃水浴中反应3～5h， 然后加入TCA溶液 在冰浴下搅拌10～ 20min； 静置后取 上清液， 加入乙醇进行沉淀； S03.取步骤S02制备得到的沉淀， 然后先用离子交换层析柱纯化， 再用凝胶层析柱进行 纯化， 即得 所述的灵芝多糖肽； 所述的离子交换层析柱纯化的具体条件为： 将步骤S02制备得到的沉淀上装填有DEAE ‑ 纤维素的离子交换层析柱； 先用2～4倍柱体积的去离子水洗脱除杂； 再用3～5倍柱体积的 0.1M氯化钠溶液洗脱， 收集0.1M氯化钠溶液洗脱下来的流份， 浓缩干燥后得离子交换层析 柱洗脱部位； 所述的用凝胶层析柱进行纯化的具体条件为： 将离子交换层析柱洗脱部位上装填有 Sephacryl  S‑300HR的凝胶层析柱， 采用5～10倍柱体积的去离子水进行洗脱； 弃去前1～ 1.5倍柱体积的去离子水洗脱下来的流份； 收集1.5～3倍柱体积的去离子水洗脱下来的流权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 113995830 A 2份， 浓缩干燥后即得 所述的灵芝多糖肽。 9.根据权利要求8所述的灵芝多糖肽纳米颗粒的制备方法， 其特征在于， 步骤S01中灵 芝提取物、 水以及木瓜蛋白酶的用量比为8～12g:75～85mL:1mg； 步骤S02中混合液与TCA溶 液的体积比为8 :1～2。 10.权利要求1～ 9任一项所述的制备 方法制备 得到的灵芝多糖肽 纳米颗粒。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 113995830 A 3