(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111363912.1 (22)申请日 2021.11.17 (83)生物保 藏信息 CGMCC NO.22285 2021.0 5.07 (71)申请人 哈尔滨医科 大学 地址 150081 黑龙江省哈尔滨市南岗区保 健路157号 申请人 哈尔滨美华 生物技术股份有限公司 (72)发明人 房勇　张凤民　侯莹　韩雪　 林枫翔　秦琦　 (74)专利代理 机构 北京精金石知识产权代理有 限公司 1 1470 代理人 朱宝莉 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01)C12N 15/31(2006.01) A61K 35/747(2015.01) A61K 9/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61K 8/99(2017.01) A61Q 19/00(2006.01) A23L 33/135(2016.01) A23L 33/10(2016.01) A23L 2/52(2006.01) A23C 9/152(2006.01) C12R 1/225(2006.01) (54)发明名称 一种用于防治结肠癌的副干酪乳杆菌及其 应用 (57)摘要 本发明提供了一株副干酪乳杆菌及其相关 产品， 所述的副干酪乳杆菌为副干酪乳杆菌PC ‑ H1， 保藏编号为CGMCC  NO.22285， 于2021年5月7 日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通 微生物中心。 本发明提供的副干酪乳杆菌PC ‑H1 制备的胞外囊泡具有抑制HCT116细胞、 SW1116细 胞以及SW620细胞的迁移和侵袭的能力， 有效地 诱导结肠癌细胞产生凋亡， 并明显抑制裸鼠移植 瘤的生长， 有很好的临床应用前 景。 权利要求书2页 说明书11页 序列表2页 附图7页 CN 114085792 A 2022.02.25 CN 114085792 A 1.一株微生物， 其特征在于， 所述的微生物为副干酪乳杆菌PC ‑H1， 保藏编号为CGMCC   NO.22285， 于2021年5月7日保藏于中国微 生物菌种保藏管理委员会 普通微生物中心。 2.一种产品， 其特征在于， 包括权利要求1所述的副干酪乳杆菌的活菌和/或其制备物； 所述的制备物为权利要求1所述的副干酪乳杆菌的死菌、 培养物、 培养物提取物、 细胞破碎 物、 发酵上清液、 发酵沉淀、 胞外囊泡、 改造 菌、 突变菌和/或诱变菌 。 3.根据权利要求2所述的产品， 其特征在于， 所述的产品为活菌制剂， 所述的副干酪乳 杆菌的含量 为1.0×105‑9.9×1010CFU/g或1.0 ×105‑9.9×1010CFU/mL。 4.一种胞外囊泡， 其特 征在于， 通过权利要求1所述的微 生物进行制备。 5.一种编码蛋白质的基因， 其特征在于， 能够编码权利要求4所述的胞外囊泡中的蛋白 质。 6.一种胞外囊泡的制备 方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： (1)取权利要求1所述的微 生物菌液接种培 养； (2)将培养后的菌液低速离心， 收集沉淀并用PBS重悬沉淀， 重悬菌液接种至培养基中 培养； (3)将步骤(2)培 养的菌液低速 离心收集上清液； (4)将收集的上清液 再次低速 离心去除较大杂质； (5)取步骤(4)得到的上清液并过 滤细菌； (6)将过滤后的上清液分批移入超速离心管中， 超速离心后弃上清， 收集每次超速离心 后得到的沉淀； (7)超速离心所有上清液后， 将收集到的含有所有沉淀的液体集中在一个超离管中进 行二次超离心； (8)弃上清， 加入PBS将沉淀从超速 离心管中冲洗下来， 再次超离心； (9)弃去PBS， 得到的沉淀即为副干酪乳杆菌PC ‑H1的胞外囊泡。 7.根据权利要求6所述的制备方法， 其特征在于， 所述的步骤(2)、 (3)、 (4)中的低速离 心的条件为4500 g、 4℃离心15min； 所述的步骤(6)、 (7)、 (8)中的超离心的条件为100000r/ min、 4℃离心6 0分钟。 8.一种副干酪乳杆菌的冻干粉， 其特征在于， 包括包埋剂和权利要求1所述的微生物的 菌体。 9.权利要求1所述的微生物、 权利要求2 ‑3所述的产品、 权利要求4所述的胞外囊泡、 权 利要求5所述的基因和/或权利要求8所述的冻干粉在制备用于预防、 治疗、 辅助治疗和或/ 预后护理肿瘤疾病， 和 /或， 用于肠胃调理的药物、 保健品、 食品、 营养品、 医疗装置、 日化用 品中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用， 其特征在于， 所述的肿瘤为消化系统肿瘤、 血液系统肿 瘤、 颅脑肿瘤、 呼吸系统肿瘤、 泌尿系统肿瘤、 内分泌系统肿瘤、 生殖系统肿瘤、 循环系统肿 瘤、 骨骼肿瘤、 皮肤肿瘤和/或软组织肿瘤。 11.根据权利要求10所述的应用， 其特征在于， 所述的消化系统肿瘤为肠癌、 胃癌、 食道 癌、 胰腺癌、 胆囊癌、 肝癌、 口腔癌和/或咽癌。 12.根据权利要求11所述的应用， 其特征在于， 所述的肠癌 为直肠癌、 结肠癌、 十二指肠 癌、 盲肠癌和/或阑尾癌。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114085792 A 213.一种医药配置品、 保健品、 食品或日化用品， 其特征在于， 所述的医药配置品、 保健 品、 食品或日化用品包含权利要求1所述的微生物、 权利要求2 ‑3所述的产品、 权利要求4所 述的胞外囊泡、 权利要求5所述的基因和/或权利要求8所述的冻干粉。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114085792 A 3