(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111353429.5 (22)申请日 2021.11.16 (71)申请人 暨南大学 地址 510700 广东省广州市天河区黄埔大 道西601号 (72)发明人 吴扬哲　 (74)专利代理 机构 北京超凡宏宇专利代理事务 所(特殊普通 合伙) 11463 代理人 张金铭 (51)Int.Cl. C12N 5/0783(2010.01) B82Y 40/00(2011.01) B82Y 30/00(2011.01) A61P 37/04(2006.01) A61P 35/00(2006.01)A61K 47/54(2017.01) A61K 33/04(2006.01) (54)发明名称 一种纳米硒微粒体系及其制备方法与应用、 调节性免疫细胞及其预处 理方法 (57)摘要 本发明公开了一种纳米硒微粒体系及其制 备方法与应用、 调节性免疫细胞及其预处理方 法， 属于生物材料技术领域。 该纳米硒微粒体系 包括纳米硒 ‑咖啡因复合物， 纳米硒 ‑咖啡因复合 物包括单质硒纳米粒子及荷载于单质硒纳米粒 子上的咖啡因。 其制备方法简单、 易操作、 得率 高、 咖啡因的荷载率高， 微粒体系稳定性好。 该纳 米硒微粒体系可通过降低细胞内的免疫抑制性 代谢物的产生， 显著增强细胞毒类免疫细胞(包 括NK细胞， γδT细胞和CD8+T细胞等)的免疫效 应功能， 达到增强抗肿瘤效应功能的最终目的。 上述纳米硒微粒体系可用于免疫细胞的预处理， 达到提高免疫细胞功效的作用， 具有非常广阔的 市场前景和产业 化价值。 权利要求书2页 说明书8页 附图3页 CN 114045260 A 2022.02.15 CN 114045260 A 1.一种纳米硒微粒体系， 其特征在于， 所述纳米硒微粒体系包括纳米硒 ‑咖啡因复合 物， 所述纳米硒 ‑咖啡因复合物包括单质 硒纳米粒子以及荷载于所述单质 硒纳米粒子上 的 咖啡因； 优选地， 所述纳米硒微粒的粒径为20 ‑200nm， 更优为20 ‑130nm； 优选地， 所述咖啡因在所述单质硒纳米粒子上的荷载率 不低于50％， 更优为5 0‑90％。 2.根据权利要求1所述的纳米硒微粒体系， 其特征在于， 所述纳米硒微粒体系为胶体形 式； 优选地， 所述纳米硒微粒体系中所述纳米硒 ‑咖啡因复合物的浓度为1 1‑15mmol/L。 3.根据权利要求1或2所述的纳米硒微粒体系， 其特征在于， 所述纳米硒微粒体系的制 备原料包括含有化 合态硒的硒源、 还原剂以及咖啡因； 其中， 所述硒源 包括亚硒酸钠， 所述还原剂包括维生素C； 优选地， 所述制备原料还 包括分散稳定剂； 优选地， 所述分散稳定剂包括壳聚糖、 聚乙烯醇、 十二烷基硫酸钠以及Pluronic  F‑127 中的至少一种。 4.如权利要求1 ‑3任一项所述的纳米硒微粒体系的制备方法， 其特征在于， 包括以下步 骤： 将所述咖啡因荷载于所述单质硒纳米粒子上。 5.根据权利要求4所述的制备方法， 其特征在于， 将含有化合态硒的硒源溶液、 咖啡因 溶液、 还原剂溶 液以及分散稳定剂溶 液混合反应； 优选地， 先将含有化合态硒的硒源溶液、 咖啡因溶液以及 分散稳定剂溶液混合， 随后再 与还原剂溶 液混合反应； 优选地， 混合反应于搅拌条件下进行； 优选地， 反应于4 ‑40℃的条件下进行12 ‑48h。 6.根据权利要求5所述的制备方法， 其特征在于， 所述含有化合态硒的硒源溶液中的硒 源的浓度为5mmol/L ‑0.5mol/L， 所述还原剂溶液中的还原剂的浓度为25mmol/L ‑1mol/L， 所 述咖啡因溶 液中的咖啡因的浓度为1 ‑100mmol/L； 所述硒源溶液与所述还原剂溶液的体积比为1:1 ‑5； 所述咖啡因溶液的体积为所述硒 源溶液及所述还原剂溶液总体积的0.1 ‑1倍； 所述咖啡因溶液及所述硒源溶液的总质量与 所述分散稳定剂溶 液的质量比为10 0： 0.1‑1。 7.根据权利要求5或6所述的制备方法， 其特征在于， 还包括： 将反应后的混合液进行透 析； 优选地， 还 包括将透析后所 得的溶液进行固液分离， 收集固相物。 8.如权利要求1 ‑3任一项所述的纳米硒微粒体系的应用， 其特征在于， 所述纳米硒微粒 体系用于对免疫细胞进行 预处理。 9.一种免疫细胞的预处理方法， 其特征在于， 包括： 用权利要求1 ‑3任一项所述的纳米 硒微粒体系对免疫细胞进行 预处理； 优选地， 所述免疫细胞包括 NK细胞、 γ δT细胞和CD 8+T细胞中的至少一种； 优选地， 预处理包括： 将所述纳米硒微粒体系以及所述免疫细胞共同置于培养基中， 并 于37℃以及5vt％CO2的条件下孵 育6‑24h； 优选地， 所述纳米硒微粒体系在所述培 养基中的浓度为1 ‑50 μmmol/L。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114045260 A 210.一种调节性免疫细胞， 其特 征在于， 经权利要求9所述的预处 理方法处 理得到。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114045260 A 3