(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111385801.0 (22)申请日 2021.11.22 (71)申请人 华南理工大 学 地址 510641 广东省广州市天河区五山路 381号 (72)发明人 张元　刘占燕　 (74)专利代理 机构 广州嘉权专利商标事务所有 限公司 4 4205 代理人 林德强 (51)Int.Cl. A61K 47/61(2017.01) A61K 47/60(2017.01) A61K 47/69(2017.01) A61K 31/713(2006.01) A61K 39/00(2006.01)A61K 48/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 37/04(2006.01) C12N 15/87(2006.01) (54)发明名称 一种纳米递送系统及其制备方法和应用 (57)摘要 本发明公开了一种纳米递送系统及其制备 方法和应用， 所述纳米递送系统包括纳米递送载 体和负电荷成分， 所述纳米载体包含胍基改性壳 聚糖、 阳离子脂质体、 两亲性化合物。 通过对壳聚 糖进行胍基改性， 使壳聚糖形成带有更多阳离子 的聚合物， 能够提高核酸分子的包 载量和转染效 率。 此纳米颗粒还具有免疫激活作用， 激活效果 优于传统的以鱼精蛋白、 阳离子脂质制备的纳米 颗粒。 本发明中， 以胍基改性壳聚糖为基础制备 的纳米颗粒可为基因治疗和免疫治疗的联合应 用提供新策略。 权利要求书2页 说明书13页 附图11页 CN 114099699 A 2022.03.01 CN 114099699 A 1.一种纳米载体， 包含改性壳聚糖、 阳离子脂质体、 两亲性化合物， 其中改性壳聚糖为 胍基改性壳聚糖。 2.根据权利要求1所述的载体， 其特征在于， 所述胍基改性壳聚糖是通过壳聚糖与双氰 胺的加成反应合成的； 优选地， 所述壳聚糖与双氰胺的摩尔比为1:(1～10)； 优选地， 所述阳离 子脂质体包括阳离 子脂质和辅助脂质； 优选地， 所述阳离 子脂质和辅助脂质的摩尔比为1:3～8 :1； 优选地， 所述阳离子脂质选自1,2 ‑二油酰‑3‑三甲基铵盐丙烷、 氯化三甲基 ‑2， 3‑二油 烯氧基丙基铵、 溴化三甲基 ‑2， 3‑二油酰氧基丙基铵、 三氟乙酸二甲基 ‑2,3‑二油烯氧基丙 基‑2‑(2‑精胺甲酰氨基)乙基铵、 溴化三甲基十二烷基铵、 溴化三甲基十四烷基铵、 溴化三 甲基十六烷基铵、 溴化二甲基双十八烷基铵、 溴化二甲基 ‑2‑羟乙基‑2， 3‑二油酰氧基丙基 铵、 溴化二甲基 ‑2‑羟乙基‑2， 3‑二油烯氧基丙基铵、 溴化二甲基 ‑3‑羟丙基‑2， 3‑二油烯氧 基丙基铵、 溴化二甲基 ‑4‑羟丁基‑2， 3‑二油烯氧基丙基铵、 溴化二甲基 ‑5‑羟戊基‑2， 3‑二 油烯氧基丙基铵、 溴化二甲基 ‑2‑羟乙基‑2， 3‑双十六烷氧基丙基铵、 溴化二甲基 ‑2‑羟乙 基‑2， 3‑双十八烷氧基丙基铵、 溴化二甲基 ‑2‑羟乙基‑2， 3‑双十四烷氧基丙基铵、 N ‑(2‑精 胺甲酰基) ‑N’， N’ ‑双十八烷基甘氨酰胺、 1,2 ‑二油酰‑3‑琥珀酰‑sn‑甘油胆碱酯、 3β ‑[N‑ (N’,N’ ‑二甲基胺乙基胺基甲酰基)]胆固醇、 脂质多聚 ‑L‑赖氨酸和硬脂胺中的至少一种； 优选地， 所述辅助脂质为中性辅助脂质； 优选地， 所述中性辅助脂质选自胆固醇、 磷脂酰乙醇胺、 磷脂酰胆碱、 二油酰基磷脂酰 乙醇胺、 1,2 ‑二油酰基 ‑sn‑丙三基‑3‑胆碱磷酸、 1,2 ‑双(10,12 ‑三甲苯二酰基) ‑sn‑甘油‑ 3‑磷酸胆碱、 2 ‑油酰‑1‑棕榈锡甘油 ‑3‑磷酸胆碱、 1,2 ‑二棕榈酰 ‑sn‑甘油‑3‑‑O‑4'‑(N， N， N‑三甲基)高丝氨酸和尿素神经酰胺中的至少一种； 优选地， 所述两亲性化合物选自DSPE ‑PEG、 1,2‑二肉豆蔻酰 ‑rac‑甘油‑3‑甲氧基聚乙 二醇、 二肉豆蔻酰基磷脂酰乙醇胺PEG、 二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺 ‑聚乙二醇和二月桂酰基 磷脂酰乙醇胺 ‑聚乙二醇中的至少一种。 3.权利要求1～3中任一项所述载体在递送货物分子系统中的应用。 4.根据权利要求3所述的应用， 其特征在于， 所述货物分子选自核酸、 肽、 蛋白质、 脂质、 化学化合物、 药物活性剂、 其生物类似物、 其生物优化物、 其生物衍生物及其生物等效物中 的至少一种； 优选地， 所述货物分子为核酸或核酸类似物； 优选地， 所述核酸或核酸类似物为siRNA、 mRNA、 shRNA、 lnc  RNA、 pDNA、 poly  IC、 CpG或 环状二核苷酸。 5.一种纳米递送系统， 包 含权利要求1～3任一项所述载体和负电荷成分。 6.根据权利要求5所述的纳米递送系统， 其特征在于， 所述负电荷成分为货物分子， 所 述货物分子选自核酸、 肽、 蛋白质、 脂质、 化学化合物、 药物活性剂、 其生物类似物、 其生物优 化物、 其生物衍生物及其 生物等效物中的至少一种； 优选地， 所述货物分子为核酸或核酸类似物； 优选地， 所述核酸、 核酸类似物为siRNA、 mRNA、 shRNA、 lnc  RNA、 pDNA、 poly  IC、 CpG或环 状二核苷酸。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114099699 A 27.根据权利要求6所述的纳米递送系统， 其特征在于， 所述纳米递送系统的粒径为10～ 350nm。 8.根据权利要求6所述的纳米递送系统， 其特征在于， 所述改性壳聚糖与货物分子的N/ P的比例为1:1～48:1； 所述阳离子脂质体与货物分子的N/P的比例为1:1～36:1， 所述两亲 性化合物占阳离 子脂质体的含量百分比为0.5％～3 0％。 9.权利要求5～8任一项所述纳米递送系统在制备产品或非治疗目的的免疫激活中的 应用； 优选地， 所述产品为药物； 优选地， 所述免疫为固有免疫或适应性免疫； 优选地， 所述 固有免疫信号通路包括： STING、 TLR诱导I型干扰素的产 生和I型干扰素与 其受体结合 诱导干扰素刺激基因转录； 优选地， 所述固有免疫信号通路涉及cGAS、 IRF3、 IFNβ 、 STAT1、 STAT2、 IRF9和Rsad2的基 因表达变化。 10.一种药物， 其特征在于， 包含权利要求所述5～8任一项所述纳米递送系统， 优选地， 所述药物还 包括药学上可接受的载体或赋 形剂。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114099699 A 3