ICS 67.050 X 40 GE 中华人民共和国国家标准 GB/T 21927—2008 食品中叔丁基对苯二酚的测定 高效液相色谱法 Determination of tertiary butylhydroquinone in foods- High-performance of liquid chromatography 2008-05-16发布 2008-11-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T21927—2008 前言 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由中国国家标准化管理委员会归口。 本标准起草单位：国家农副加工食品质量监督检验中心、安徽国家农业标准化与监测中心。 本标准主要起草人：卢业举、顾亮、刘坤、陈戈、刘琴芳、沈宏林、蒋俊树 GB/T21927—2008 食品中叔丁基对苯二酚的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了食品中叔丁基对苯二酚（TBHQ的高效液相色谱-荧光检测器测定方法 本标准适用于食用油脂、油炸食品、干鱼制品、饼干、方便面、速煮米、干果罐头、腌制肉制品等食品 中TBHQ的测定 本标准各类食品中TBHQ检出限为0.05μg/mL（进样量10μL）。 2原理 本标准用乙睛提取食品中的TBHQ，用正已烧脱脂。测试液用乙睛和1.5%的乙酸作为洗脱液，经 反相C18色谱柱分离，荧光检测器检测，以外标法定量。 3试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水或同等纯度的水。 3.1叔丁基对苯二酚（TBHQ)标准品：纯度≥98%。 3.2L-抗坏血酸棕榈酸酯。 3.3正已烷。 3.4冰乙酸。 3.5乙腈：色谱纯。 3.6饱和乙睛：将乙睛和正已烷混合，在分液漏斗中充分振摇。静置分层，收集下层溶液，并于每升溶 液中溶解100mg的L-抗坏血酸棕榈酸酯。 3.7TBHQ标准储备液：准确称取100mgTBHQ，加饱和乙溶解定容至100mL。TBHQ浓度为 1mg/mL，0℃~4℃避光保存。 3.8TBHQ标准溶液：准确移取1mLTBHQ的储备液，加饱和乙睛定容至100mL，分别移取1.0， 5.0，10.0,20.0,50.0mL该TBHQ溶液，放人100mL容量瓶，加饱和乙睛至刻度，制成TBHQ含量分 别为0.10.5，1,2,5，10.0μg/mL的TBHQ标准溶液，用于制定标准曲线。 4仪器和设备 4.1高效液相色谱仪，附荧光检测器。 4.2移液器。 4.3振荡器。 4.4微孔过滤器：孔径0.45μm，有机溶剂型滤膜。 5分析步骤 5.1样品处理 SAG 5.1.1食用油脂 称取混合均匀的样品10g（精确至0.001g），用正已烷溶解并定容至100mL。移取20mL该溶液 至150mL分液漏斗中，加人20mL饱和乙睛，振摇1min。静置分层，收集下层乙腈层后，再加人 20mL饱和乙睛，重复萃取一次，合并乙睛层定容至50mL。经0.45um滤膜过滤作为测试液 1 GB/T21927—2008 5.1.2油炸食品、干鱼制品、腌制肉制品等 称取混合均匀的样品2.5g（精确至0.001g），置于100mL具塞锥形瓶中，用20mL饱和乙睛振荡 提取5min，再加人20mL正已烷继续振荡5min，过滤到分液漏斗中，静置分层后，收集下层乙睛层；再 向样品残渣中加人20mL正已烷振荡提取10min，再过滤到分液漏斗中，加人20mL乙睛，振摇1min， 静置分层，收集合并乙睛层定容至50mL容量瓶中。经0.45um滤膜过滤作为测试液。 5.1.3饼干、方便面、速煮米、干果罐头等 称取混合均匀的样品2.5g（精确至0.001g），置于100mL具塞锥形瓶中，用20mL饱和乙睛振荡 提取10min，收集下层乙睛层。在样品残渣中再加人20mL饱和乙睛振荡提取10min，合并两次提取 的乙睛层，在容量瓶中定容至50mL。经0.45um滤膜过滤作为测试液。 5.2参考色谱条件 5.2.1色谱柱：ODS-Cis,4.6mmX250mm,5μm。 5. 2. 2 流动相：参考梯度洗脱程序见表1。 表1林 梯度洗脱条件 流动相 时间/min 乙腈/% 1.5%乙酸/% 0 40 60 10.0 40 60 100 11. 0 0 18.0 100 0 19.0 40 60 22.0 40 60 5.2.3流速：1.0mL/min。 5.2.4激发波长：293nm。 5.2.5发射波长：332nm。 5.3测定 在上述工作条件下，分别取标准使用溶液10L进行高效液相色谱分析，以峰面积为纵坐标，以标 准溶液中TBHQ浓度为横坐标，绘制标准曲线。 取样品测试液10L进样，以面积外标法定量。 TBHQ标准样品色谱图参见附录A。 6结果计算 食品中TBHQ的含量按式（1)计算： cXVIXV. X= ..(1) mXV,X1000 式中： 被测食品中TBHQ含量，单位为克每千克（g/kg）； X- 样品溶液中TBHQ浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； A 乙睛溶液最终定容的总体积，单位为毫升（mL）； V3一溶解试样的正已烷总体积，单位为毫升（mL）； 称取的样品质量，单位为克（g）； V,——从V分取的正已烷体积，单位为毫升（mL）。 注：样品若按照5.1.2或5.1.3进行处理，则无V²、V项。 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 2 GB/T 21927—2008 附录A （资料性附录） TBHQ标准样品色谱图 [1.3- 0.2 (1. 1 3 imin 0 10 15 图 A.1 TBHQ标准样品色谱图（2.0μg/mL）