ICS 67.120 x 04 中华人民共和国国家标准 GB/T22288—2008 植物源产品中三聚氰胺、三聚氰酸一酰胺、 三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸的测定 气相色谱-质谱法 Determination of melamine,ammeline,ammelide and cyanuric acid in original plant productsGC-MS method 2008-08-12发布 2008-12-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 22288—2008 前言 本标准附录A、附录B和附录 C均为资料性附录 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：李淑娟、李刚、李建中、安娟、陈冬东、蔡会霞、丁涛、蒋原、彭涛、代汉慧、唐英章。 GB/T22288—2008 植物源产品中三聚氰胺、三聚氰酸一酰胺、 三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸的测定 气相色谱-质谱法 1范围 本标准规定了植物源产品中三聚氰胺、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸测定的气相色 谱/质谱检测方法。 本标准适用于小麦粉、玉米粉、大米粉中三聚氰胺、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸含 量的测定。 2原理 试样用溶剂提取，提取液经氮吹仪浓缩后用硅烷化试剂衍生，使用GC-MS在选择监测离子模式下 对三聚氰胺、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸进行检测和确证，外标法定量， 3试剂与材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水或相当纯度的水。 3.1 二乙胺。 3.2乙睛：色谱纯。 3.3吡啶：纯度≥99%。 3.4硅烷化试剂：含有1%三甲基一氯硅烷（TMCS)的N,O-双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）。 3.5提取溶剂：二乙胺-水-乙睛（10十40十50，体积比）。 3.6 三聚氰胺：纯度≥99.0%，CAS编号：108-78-1。 3.7 三聚氰酸二酰胺：纯度≥99.0%，CAS编号：645-93-2。 3. 8 三聚氰酸一酰胺：纯度≥99.5%，CAS编号：645-92-1。 3.9 9三聚氰酸：纯度≥99.0%，CAS编号：108-80-5。 超声溶解并分别定容于100mL容量瓶中，一18℃以下冷冻避光保存，有效期3个月。 3.11混合标准中间溶液：分别移取1.0mL四种标准储备液于同一10mL容量瓶中，用提取溶剂 （3.5）定容，充分摇匀，得到浓度为10.0μg/mL的混合标准工作液。0℃～4℃冷藏避光保存，有效期 1个月。 4仪器和设备 4.1气相色谱-质谱联用仪：配有电子轰击（EI)源。 4.2天平：感量为0.1mg和0.001g。 4.3超声波清洗器。 4.4氮吹仪。 4. 5 离心机。 4.6涡旋混合器。 1 GB/T222882008 4.7样品粉碎机：配40目样品筛。 4.8恒温培养箱。 5试样制备和保存 取有代表性的样品，用密封袋或样品瓶封装后于0℃～4℃保存，每份样品量应天于100g，并标明 标记。如果样品颗粒较大，应用样品粉碎机将其粉碎并使其全部通过40目的样品筛后再保存。制样操 作过程中应防止样品受到污染或发生含量的变化， 6分析步骤 SAG 6.1提取 称取试样0.5g（精确至0.001g）于50mL具塞离心管中，加入20mL提取溶剂（3.5）涡旋1min，超 声提取30min。然后于4000r/min下离心5min，取200μL上层清液于10mL尖底具塞玻璃比色管 中，在70℃下经氮气吹干。 6.2衍生化 向吹干后的比色管中加入300μL吡啶（3.3）和200μL硅烷化试剂（3.4），超声1min，涡旋1min后 于70℃下衍生45min，衍生化溶液供气相色谱-质谱测定。 6.3测定 6.3.1气相色谱-质谱条件 a){ b) 程序升温：初始温度为70℃，保持1min；先以15℃/min的速率升至250℃；再以30℃/min 的速率升至300℃并保持5min； c) 进样口温度：280℃； d) 色谱/质谱接口温度：280℃； e) 载气：氢气； f) 流速：1.0mL/min; g) 电离方式：EI； h) 电离能量：70eV； i) 离子源温度：230℃； j) 四级杆温度：150℃； k) 监测方式：选择离子监测（SIM)方式； 1) 进样方式：不分流方式，溶剂延迟6min； m) 进样量：1uL； n) 待测物保留时间、监测离子及相对丰度参见附录A。 6.3.2标准工作曲线 将混合标准中间溶液（3.11）逐级稀释至20ng/mL、40ng/mL、100ng/mL、200ng/mL、400ng/mL的混 合标准工作溶液，分别移取各浓度混合标准溶液0.5mL，于70℃经氮气吹干后，按照6.2进行衍生化，供 气相色谱-质谱分析测定。以标准工作溶液浓度为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线。 6.3.3定性测定 在6.3.1仪器条件下，如果样品中三聚氰胺、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸的选择 离子质量色谱图的保留时间与标准工作液相同，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选离子均出现， 并且所选择离子的丰度比与标准品对应离子的丰度比在充许范围内（所选范围见表1），则可判定样品 中存在对应的待测物。相关标准物质谱图参见附录B。 2 GB/T22288—2008 表1定性确证时相对离子丰度的最大允许相对偏差 相对离子丰度 >50% >20%~50% >10%~20% ≤10% 允许的相对偏差 ±10% ±15% ±20% %0%干 6.3.4定量测定 根据样液中被测物的含量情况，选定浓度相近的混合标准工作溶液。标准工作溶液和样液中被测 物的浓度均应在标准曲线线性范围内。如果样液中被测物的浓度超出标准曲线线性范围，应按比例提 高6.1中提取溶剂的体积。在6.3.1仪器条件下，三聚氰酸、三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺和三聚 氰胺的保留时间依次为9.9min、10.7min、11.4min和11.9min。 6.3.5空白实验 除不称取试样外，均按上述分析步骤进行。 7结果计算 试样中待测物的含量按式(1)计算： (c-co). V X, = X s ..(1) m X1000 式中： X;一一试样中待测物含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； 从标准工作曲线上得到的样液中待测物含量，单位为纳克每毫升（ng/mL）； 0. 从标准工作曲线上得到的空白实验中待测物的含量，单位为纳克每毫升（ng/mL）； 样品溶液最终定容体积，单位为毫升（mL）； 稀释倍数； 所称样品的质量，单位为克（g）。 m- 8测定低限 本方法中三聚氰胺、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸的测定低限均为2.0mg/kg。 回收率与精密度 9 回收率及精密度数据参见附录C。 3